武漢思特進(jìn)公司(多圖)-原位雜交儀制造廠家
原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精3確定量定位的過程。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。
原位雜交技術(shù)(in situ hybridization,ish)是分子生物學(xué)、組織化學(xué)及細(xì)胞學(xué)相結(jié)合而產(chǎn)生的一門新興技術(shù),始于20世紀(jì)60年代。
原位pcr;原位雜交細(xì)胞定位和pcr的高靈敏度相結(jié)合的技術(shù),在細(xì)胞(爬片、甩片或涂片)或組織(石蠟、冰凍切片)上直接對(duì)靶*片段進(jìn)行擴(kuò)增,通過摻入標(biāo)記基團(tuán)直接顯色或結(jié)合原位雜交進(jìn)行檢測(cè)的方法。
原位雜交是指;分子雜交的一種形式。由未經(jīng)抽提分離的染色體dna,在原來位置上被變性成單鏈后,與探針進(jìn)行分子雜交。1977年由本頓(w.d.be*n)和戴維斯(r.w.d*is)在原分子雜交基礎(chǔ)上發(fā)展的一種較新的分子雜交技術(shù)。方法是將菌落或噬菌斑轉(zhuǎn)移到硝9酸纖維素濾膜上,使在原位發(fā)生溶菌后變性的dna,同濾膜原位結(jié)合,再與有放5射性同位素標(biāo)記的特定核苷酸“探針”雜交,其結(jié)果可用放5射自顯影來顯示,出現(xiàn)銀粒的地方便是待測(cè)染色體dna上與探針互補(bǔ)順序所在的位置。對(duì)快速檢測(cè)轉(zhuǎn)化群落中的dna序列或任何一種插入的dna序列,以及動(dòng)植物的*定位工作,都具有廣泛應(yīng)用價(jià)值。(見“分子雜交”、“放5射自顯影”、“影印培養(yǎng)技術(shù)”)
根據(jù)不同的雜交實(shí)驗(yàn)要求,應(yīng)選擇不同的核酸探針。在大多數(shù)情況下,可以選擇克0隆的dna或cdna雙鏈探針。但是在有些情況下,必須選用其它類型的探針如寡核苷酸探針和rna探針。例如,在檢測(cè)靶序列上的單個(gè)堿基改變時(shí)應(yīng)選用寡核苷酸探針,在檢測(cè)單鏈靶序列時(shí)應(yīng)選用與其互補(bǔ)的dna單鏈探針(通過克0隆人m13噬菌體dna獲得)或rna探針,寡核苷酸探針也可。長(zhǎng)的雙鏈dna探針特異性較強(qiáng),適宜檢測(cè)復(fù)雜的靶核苷酸序列和病原體 ,原位雜交儀制造廠家,但不適宜于組織原位雜交,因?yàn)樗灰淄高^細(xì)胞膜進(jìn)入胞內(nèi)或核內(nèi)。在這種情況下,寡核苷酸探針和短的pcr標(biāo)記探針(80~150bp)具有較大的優(yōu)越性。
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