遼寧微生物檢測公司- 武漢世紀久海檢測(圖)

2.薄膜過濾法
除另有規(guī)定外，按計數(shù)方法適用性試驗確認的方法進行供試液制備。取相當于1g、1ml或10c㎡供試品的供試液，若供試品所含的菌數(shù)較多時，可取適宜稀釋級的供試液，照方法適用性試驗確認的方法加至適量稀釋液中，立即過濾，沖洗，沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
培養(yǎng)和計數(shù) 培養(yǎng)條件和計數(shù)方法同平皿法，每張濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不超100cfu。
菌數(shù)報告規(guī)則 以相當于1g、1ml或10c㎡供試品的菌落數(shù)報告菌數(shù)；若濾膜上無菌落生長，以lt;1報告菌數(shù)（每張濾膜過濾1g、1ml或10c㎡供試品），或lt;1乘以*低稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。
接種大腸埃希菌、金*球菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)18～24小時；接種白色的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中，20～25℃培養(yǎng)24～48小時。上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為50～100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基中，20～25℃培養(yǎng)5～7天，加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液，微生物檢測公司，將孢子洗脫。然后，采用適宜方法吸出孢子懸液至無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)50～100cfu的孢子懸液。
培養(yǎng)基的制備
1.胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基
胰酪胨17.0克
氯化鈉5.0克
大豆木瓜蛋白酶消化物3.0克
*氫二鉀2.5克
葡萄糖（一水合）2.5克
水1000ml
除葡萄糖外，取上述成分，混合，微溫溶解，濾過，調(diào)節(jié) ph 值使滅菌后在 25℃的 ph 值為 7.3±0.2，加入葡萄糖，分裝，滅菌。
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基置 20～25℃培養(yǎng)。
2. 胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基
胰酪胨15.0克
氯化鈉5.0克
大豆木瓜蛋白酶水解物5.0克
瓊脂15.0克
水1000ml
除瓊脂外，取上述成分，混合。微溫溶解，調(diào)節(jié) ph 值使滅菌后在 25℃的 ph 值為 7.3±0.2，加入瓊脂，加熱溶化后，搖勻，分裝，滅菌。
3.沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基
沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基照微生物限度檢查法（附錄ⅹⅲ c）制備。
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