蛋白質(zhì)折疊*盒-友名生物(圖)

微量凱氏（kjeldahl）定氮法
樣品與濃1*共熱。含氮有機物即分解產(chǎn)生氨（消化），氨又與*作用，變成*氨。經(jīng)強堿堿化使之分解放出氨，借蒸汽將氨蒸至酸液中，根據(jù)此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。若以甘氨酸為例，其反應(yīng)式如下：
nh2 ch2 cooh 3h2 so4 ――2co2 3so2 4h2o nh3 (1)
2nh3 h2 so4 ――(nh4 )2 so4 (2)
(nh4 )2 so4 2naoh――2h2 o na2 so4 2nh3 (3)
反應(yīng)（1）、(2)在凱氏瓶內(nèi)完成，反應(yīng)（3）在凱氏蒸餾裝置中進行。為了加速消化，可以加入cuso4作催化劑，k2so4以提高溶液的沸點。收集氨可用*溶液，滴定則用強酸。實驗和計算方法這里從略。計算所得結(jié)果為樣品總氮量，如欲求得樣品中蛋白含量，應(yīng)將總氮量減去非蛋白氮即得。如欲進一步求得樣品中蛋白質(zhì)的含量，即用樣品中蛋白氮乘以6．25即得。
原子數(shù)由m個氨基酸，n條肽鏈組成的蛋白質(zhì)分子，至少含有n個—cooh，至少含有n個—nh2，肽鍵m-n個，蛋白質(zhì)折疊*盒，o原子m n個。分子質(zhì)量設(shè)氨基酸的平均相對分子質(zhì)量為a，含b個二硫鍵，蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量=ma-18(m-n)-2b*控制*中的核苷酸 6信使rna中的核苷酸 3蛋白質(zhì)中氨基酸 1。蛋白質(zhì)是由c（碳）、h（氫）、o（氧）、n（氮）組成，一般蛋白質(zhì)可能還會含有p（磷）、s（硫）、fe（鐵）、zn（鋅）、cu（銅）、b（硼）、mn（錳）、i（碘）、mo（鉬）等。這些元素在蛋白質(zhì)中的組成百分比約為：碳50% 氫7% 氧23% 氮16% 硫0~3% 其他微量。
（1）一切蛋白質(zhì)都含氮元素，且各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近，均為16%；
（2）蛋白質(zhì)系數(shù)：任何生物樣品中每1g元氮的存在，就表示大約有100/16=6.25g蛋白質(zhì)的存在， 6.25常稱為蛋白質(zhì)常數(shù)。
蛋白質(zhì)含量測定方法之雙縮脲法（biuret法）
實驗原理雙縮脲（nh3conhconh3）是兩個分子脲經(jīng)180℃左右加熱，放出一個分子氨后得到的產(chǎn)物。在強堿性溶液中，雙縮脲與cuso4形成紫色絡(luò)合物，稱為雙縮脲反應(yīng)。凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鍵，或能過一個中間碳原子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮脲反應(yīng)。
紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān)，故可用來測定蛋白質(zhì)含量。測定范圍為1-10mg蛋白質(zhì)。干擾這一測定的物質(zhì)主要有：*銨、tris緩沖液和某些氨基酸等。
此法的優(yōu)點是較快速，不同的蛋白質(zhì)產(chǎn)生顏色的深淺相近，以及干擾物質(zhì)少。主要的缺點是靈敏度差。因此雙縮脲法常用于需要快速，但并不需要十分準確的蛋白質(zhì)測定。
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